大阪大学大学院工学研究科の高橋幸生准教授(兼任：理化学研究所チームリーダー)、鈴木明大大阪大学大学院生（現：北海道大学電子科学研究所助教）らの研究グループは、暗視野Ｘ線タイコグラフィの実証に成功しました。

Ｘ線タイコグラフィは、厚い試料であっても高い空間分解能を発揮できるＸ線イメージング技術であり、現在、世界中の多くの放射光施設で盛んに研究開発が進められています。Ｘ線タイコグラフィの空間分解能と感度を向上させるためには、試料からの回折強度パターンを極めて広い強度ダイナミックレンジで取得しなければならず、高輝度Ｘ線光源と高性能な二次元Ｘ線検出器が必要です。

今回、本研究グループは、微小構造体からの散乱Ｘ線を参照光とするインラインホログラフィ とＸ線タイコグラフィを組み合わせることで回折強度パターンのダイナミックレンジを1000分の1程度圧縮する新手法「暗視野Ｘ線タイコグラフィ」 （図1） を大型放射光施設SPring-8 において実証し、生物試料の高空間分解能イメージングに成功しました （図2） 。

この成果によって、比較的安価である光子計数率の小さい二次元Ｘ線検出器を用いても、Ｘ線タイコグラフィによる高空間分解能・高感度イメージングが可能になり、本手法の普及が期待されます。また、高性能な二次元Ｘ線検出器を駆使することで世界最高性能の空間分解能・感度の実現することが可能となります。

本研究成果は、平成28年10月13日に英国Nature Publishing GroupのScientific Reports誌に公開されました。

図1　暗視野Ｘ線タイコグラフィ測定の概念図

図2　暗視野Ｘ線タイコグラフィによって観察したテストパターン(左)ならびに磁性細菌(右)とその拡大像

Ｘ線タイコグラフィはＸ線の可干渉性(コヒーレンス) を利用したイメージング技術であり、従来のＸ線顕微鏡では得られない高い空間分解能を有するため、次世代のＸ線イメージング技術として、近年、放射光施設を中心に盛んに研究開発が行われています。Ｘ線タイコグラフィを用いて高い空間分解能と感度で試料を観察するためには、試料の回折強度パターンを広いダイナミックレンジで計測することが必要です。したがって、高輝度コヒーレントＸ線源と高性能二次元Ｘ線検出器の存在が欠かせません。

前者については、現在、世界的に高輝度低エミッタンス放射光源の開発が盛んであり、放射光の可干渉性が向上しています。後者については、特に高エネルギーＸ線用の二次元Ｘ線検出器で、光子計数率の大きなハイブリッド型ピクセル検出器 が登場したことで、短時間でダイナミックレンジの大きな回折強度パターンを取得することが可能になってきました。ただ、ハイブリッド型ピクセル検出器は極めて高価であることに加え、現状の光子計数率では、将来の高輝度放射光源をする際、光子計数率が追いつかなくなることが予測されています。

今回、開発チームは、暗視野Ｘ線タイコグラフィという新手法を提案し、それを大型放射光施設SPring-8における実験で実証しました。 図1 に暗視野Ｘ線タイコグラフィの概念図を示します。暗視野Ｘ線タイコグラフィでは、試料の上流に微小円柱構造体を配置します。入射Ｘ線は試料を照射する前に、円柱構造体を照射します。その際、円柱構造体によってＸ線が散乱します。この散乱Ｘ線が参照光となって、検出器面上で試料のインラインホログラムを形成します。このインラインホログラムは、試料を透過したＸ線が有している試料の構造情報を含むため、透過Ｘ線を測定せずとも、インラインホログラムで補完できます。透過Ｘ線強度は大きいため、金属遮蔽板（ビームストップ）によって透過Ｘ線を遮ることで、結果として、回折強度パターンのダイナミックレンジが1000分の1程度に圧縮されます。したがって、目的の空間分解能と感度を達成するために必要とされる回折強度パターンのダイナミックレンジが従来法と比較して1000分の1程度小さくて済みます。

今回、SPring-8での実証実験で得られた試料の観察像を図2に示します。検出器として光子計数率の小さなCCD検出器を用いて30nmの厚さのタンタルで構成されるテス試料を11.5nmの空間分解能(ピクセルサイズ9.1nm)、0.01ラジアンの位相分解能で観察することに成功しました。これは、硬Ｘ線を用いたＸ線タイコグラフィとしては世界最高水準の性能です。また、生物試料として磁性細菌 を観察した結果、細菌の外形ならびに内部に含まれる直径20-70nmの微小磁石が数珠状に並んだマグネトソームを可視化することにも成功しました。

諸外国では、高価なハイブリッド型ピクセルアレイ検出器を駆使して、今回の結果と同等の空間分解能と感度を達成しています。今回、比較的安価で光子検出率の小さなCCD検出器を用いて、世界最高水準の空間分解能と感度を達成できたことから、本手法の普及・促進が期待できます。また、暗視野Ｘ線タイコグラフィの測定をハイブリッド型ピクセルアレイ検出器で行うことで、世界最高の感度と空間分解能の達成が期待されます。

本研究成果は、2016年10月13日に英国科学誌「Scientific Reports」（オンライン）に掲載されました。

タイトル：Dark-field X-ray ptychography: Towards high-resolution imaging of thick and unstained biological specimens
著者名：Akihiro Suzuki, Kei Shimomura, Makoto Hirose, Nicolas Burdetand Yukio Takahashi
DOI：10.1038/srep35060

なお、本研究は、JST先端計測分析技術・機器開発プログラムの開発課題「暗視野X線タイコグラフィ法の開発」（チームリーダー：大阪大学大学院工学研究科高橋幸生准教授開発期間：平成26年度～平成29年度）の一環として実施されました。引き続き世界最高の感度と分解能の達成を目指して開発を行います。