東京工業大学生命理工学院生命理工学系の山田拓司准教授と大阪大学大学院医学系研究科の谷内田真一教授(ゲノム生物学講座・がんゲノム情報学、前国立がん研究センター研究所・ユニット長)、慶應義塾大学先端生命科学研究所の福田真嗣特任教授、国立がん研究センター・中央病院内視鏡科の斎藤豊科長らの研究グループは、胃がんの治療として胃切除 の手術を受けた患者を対象に、凍結便を収集しメタゲノム解析 やメタボローム解析 を行いました。

腸内細菌は、病気の発症や進行だけでなく術後の病状にも関与しています。本研究では、胃切除後の患者の併発症や栄養状態などの改善を目的として、これまでほとんど解明されていない、胃切除の影響による腸内細菌叢 の構造や代謝物質の変化を調べ、術後の併発症 との関連性を検討しました。その結果、胃切除術を受けた患者は健常者と比較して腸内環境に大きな違いがあり、大腸がんと関連する細菌や代謝物質が増加していることを明らかにしました。この成果は、便検体を用いて腸内環境を評価することにより、胃切除後の併発症の要因を理解し個々人の腸内環境を評価することで、胃切除後の併発症の予防や治療に貢献する医薬品などを生み出す可能性を示すものです。

本研究は1月17日に英国学会誌「Gut」に掲載されました。

ヒト一人の細胞数が約37兆個であるのに対し、ヒト一人あたりの腸内細菌数はおよそ40兆個、重さにして約1～1.5kgとされています。これらの腸内細菌叢の乱れが炎症性腸疾患 などさまざまな疾患と関係することが、最近になって分かってきました。また腸内細菌が、胃切除を含むさまざまな治療と関連する可能性があることも報告されています。胃切除は胃がんや重篤な肥満の治療法であり、欧米における肥満の治療のための胃切除手術の場合、術後の体重減少が腸内細菌叢の変化と関連することが報告されています。しかしながら、胃がんの治療のための胃切除による腸内環境への影響は、これまでほとんど明らかになっていませんでした。胃切除術後には、低栄養や貧血、ダンピング症候群などの併発症があります。また胃がんの患者は、腸内細菌との関連が指摘されている異時性大腸がんを術後に発症するリスクが高いことが知られています。したがって、胃切除術を受けた患者における腸内環境を探索することは重要と考えられました。

研究グループでは、国立がん研究センター・中央病院内視鏡科（斎藤豊科長ら）を受診し、大腸内視鏡検査（大腸カメラ）を受けた106名の受検者（胃切除した患者50人と健常者56人）を対象として、食事などの「生活習慣などに関するアンケート」調査、凍結便、大腸内視鏡検査所見などの臨床情報を収集しました。この凍結便に対して、東京工業大学（山田拓司准教授ら）や慶應義塾大学先端生命科学研究所（福田真嗣特任教授ら）と共同で、メタゲノム解析とメタボローム解析を行いました。その上で、胃切除した患者50人と健常者56人の腸内細菌叢を比較し胃切除後の患者に特徴的な細菌や代謝物質を探索しました。

その結果、胃がんの治療のための胃切除術と、それに伴う消化管の再建が、患者の腸内環境に大きな影響を与えることが明らかになりました。これを踏まえて、胃切除後の生理学的な変化が、腸内細菌叢や代謝物質にどのような変化をもたらし、それが術後の病態にどのように影響するのかという、それぞれの変化の関連性について検討しました （図1） 。

本研究で行った解析では、胃切除後の患者は健常者と比較して、腸内細菌の種の豊富さ と種の多様性 の高さが確認されました （図2A、B） 。これらの違いは、胃切除による腸内環境の変化を反映している可能性があります。その変化の1つとして、胃切除後の患者では、口腔内でよく検出される細菌の相対的な量が多いことが確認されました （図2C） 。

胃切除術は、栄養障害、貧血、下痢、ダンピング症候群 などを引き起こすなど、術後の患者の代謝に影響を及ぼすことも広く知られています。本研究の解析でも、術後の患者の代謝の変化に関連する、腸内細菌の代謝機能の変化が見られました。例えば、胃切除後の患者では、小腸でのビタミンB12の吸収不足が知られていますが、今回の解析でも、ビタミンB12が小腸で吸収されずに大腸まで残り、それを細菌が利用するべく、ビタミンB12の摂取能力を持つ細菌が増加することが観察されました。

胃がんの患者は、異時性大腸がん を発症するリスクが高いことも報告されています。胃切除後の発がんメカニズムは、散発性大腸がん（通常の大腸がん）とは異なる可能性がありますが、本研究では、散発性大腸がんに関連することが知られている細菌の種類や代謝物質が胃切除後に多いことが観察されました。研究チームは最近、大腸がんの発生の初期にのみ増加する細菌を同定しています（Nature Medicine 2019年6月号）。今回の解析でも、その1つであるAtopobium parvulum （図2D） や、発がんの初期から関連することが知られているFusobacterium nucleatum （図2E） が、胃切除後の患者で増加していることが認められました。特に、胃全摘術を受けた患者では、Fusobacterium nucleatumの量が多いことも確認されました （図2F） 。さらに、肝臓がんおよび散発性大腸がんにおいて発がん性が知られているデオキシコール酸も、胃切除後の患者の便中に多く含まれていました （図3B） 。こうした結果は、胃切除後の患者に対する定期的な全身のフォローアップの重要性を示しています。

図1　本研究によって得られた仮説の概略図
胃切除による生理学的な変化を灰色、本研究により明らかになった腸内環境の変化を青色、その腸内環境の変化による影響を赤色で示しています。点線の矢印は、本研究の結果から説明できる繋がりを表しています。実線の矢印は、それぞれの繋がりが先行研究によって得られた仮説であることを表しています。

図2　胃切除後の患者の腸内細菌叢の変化
腸内細菌の種の豊富さ（A）とその多様性（B）はどちらも、胃切除後の患者で多いことが確認されました。（D、E、F）は、大腸がんの発がんとの関連性が報告されている細菌の一部の相対的な存在量を表しています。発がんの初期にのみ量が多いAtopobium parvulum（D）と、発がんの初期に関係することが知られているFusobacterium nucleatum（E）は胃切除後の患者で多いことが分かりました。また、Fusobacterium nucleatumは胃を全摘出した患者で特に多いことが確認されました（F）。D、E、Fでは図中の外れ値を省略して表示しています。

図3　散発性大腸がんと関連する代謝物質の変化
メタボローム解析により、胆汁酸 と関連がある代謝物質が胃切除後の患者で変化していることが認められました。肝臓がんおよび散発性大腸がんで発がん性が知られているデオキシコール酸は、胃切除後の患者で多いことが確認されました。一次胆汁酸であるタウロコール酸とグリココール酸は肝臓で生成され、その後腸肝循環 によって腸管内へ移動され、腸内細菌によってコール酸と二次胆汁酸の1つであるデオキシコール酸へ代謝されることが知られています。図中の代謝物質の箱ひげ図は外れ値を省略して表示しています。

本研究では、胃切除後の病態メカニズムを腸内環境の変化という観点から検討しました。その成果は、胃切除だけではなく、他の疾患の治療後の長期的な併発症にも応用可能なフレームワークの可能性を示しています。また、本研究成果は、胃切除後の患者に定期的に大腸内視鏡検査を行って、異時性大腸がんの発生を早期に発見する必要性がある可能性を示唆しています。本研究で明らかになった知見は、便検体を用いた腸内環境の観点から、胃切除後の低栄養や貧血などの病態を理解し、今後、その病態を非侵襲的に評価する手法として応用される可能性や、術後の栄養状態の改善などに腸内細菌の観点から介入し、それらを改善する医薬品や健康食品などを生み出す可能性があります。

本研究は下記事業の支援を受けて行われました。
・日本医療研究開発機構（AMED）難治性疾患実用化研究事業「医と食をつなげる新規メカニズムの解明と病態制御法の開発」
研究開発課題：生体試料（糞便や腸管粘膜等）のサンプリング法や解析法（特にメタゲノムならびにメタボローム解析）の標準化と臨床情報を含む統合的情報基盤の構築
研究代表者：谷内田真一（大阪大学 大学院医学系研究科 がんゲノム情報学 教授、前 国立がん研究センター がんゲノミクス研究分野・特任ユニット長）
・日本医療研究開発機構 次世代がん医療創生研究事業（P-CREATE）
研究開発課題：“Microbiome-Based Precision Medicine”を見据えた腸内微生物叢の変動に基づく大腸がん発症機構の解明と予防・診断・治療技術の創出
研究代表者：山田拓司（東京工業大学 生命理工学院 生命理工学系 准教授）
・科学技術振興機構（JST）戦略的創造研究推進事業 さきがけ
研究領域：ビッグデータ統合利活用のための次世代基盤技術の創出・体系化
研究課題名：ヒト腸内環境ビッグデータ
研究者：山田拓司（東京工業大学 生命理工学院 生命理工学系 准教授）
・科学技術振興機構 戦略的創造研究推進事業 AIP 加速課題
研究課題名：ヒト腸内環境ビッグデータを基軸とした Microbiome-based Precision Medicine
研究代表者：山田拓司（東京工業大学 生命理工学院 生命理工学系 准教授）

掲載誌：Gut
論文タイトル：Influence of gastrectomy for gastric cancer treatment on faecal microbiome and metabolome profiles
著者：Pande Putu Erawijantari ¹ , Sayaka Mizutani ^1,2 , Hirotsugu Shiroma ¹ , Satoshi Shiba ³ , Takeshi Nakajima ⁴ , Taku Sakamoto ⁴ , Yutaka Saito ⁴ , Shinji Fukuda ^5,6,7 , Shinichi Yachida ^3,8* , Takuji Yamada ^1*
1 School of Life Science and Technology, Tokyo Institute of Technology, Tokyo, Japan
2 Research Fellow of Japan Society for the Promotion of Science, Tokyo, Japan
3 Division of Cancer Genomics, National Cancer Center Research Institute, Tokyo, Japan
4 Endoscopy Division, National Cancer Center Hospital, Tokyo, Japan
5 Institute for Advanced Biosciences, Keio University, Yamagata, Japan
6 Intestinal Microbiota Project, Kanagawa Institute of Industrial Science and Technology, Kanagawa, Japan
7 Transborder Medical Research Center, University of Tsukuba, Ibaraki, Japan
8 Department of Cancer Genome Informatics, Graduate School of Medicine, Osaka University, Osaka, Japan
* Corresponding authors（責任著者）
DOI：10.1136/gutjnl-2019-319188