本研究結果は、英国科学雑誌であるBMC Biology誌に掲載されました（日本時間12月2日オンライン版掲載）。

脳の正常な発達は、遺伝的にネットワークを形成するようにプログラミングされた神経細胞同士の結合（シナプス結合）から始まります。これまでの先行研究では、胎生期に同じ神経幹細胞 から生まれた姉妹神経細胞 同士 （図1） は、生後の発達過程においてシナプス結合 を形成しやすいことが報告されていました。つまり、生後のシナプス結合の形成には、胎生期の遺伝子プログラミング が深く関与していると考えられるのですが、その詳しい遺伝子制御や、分子メカニズムについては、これまでよく分かっていませんでした。

今回私たちは、生後発達期のマウスの大脳皮質体性感覚野 に着目し、この領域のシナプス結合を詳細に解析しました （図1） 。結果、二つの姉妹細胞がお互いにシナプス結合を形成する双方向性シナプス結合 の関係にあることを発見しました （図2） 。これまでの先行研究によって、双方向性シナプス結合している神経細胞ペアは同じ情報を共有していることが明らかにされていることからも、この双方向性シナプス結合は脳内の情報処理メカニズムにおいて大変重要な結合と考えられています。

さらに胎生期にのみ存在し、遺伝子の発現を制御する酵素である「DNAメチル化酵素（Dnmt3b） 」による遺伝子発現制御が、双方向性シナプス結合の形成に必要であることがこのDnmt3bの遺伝子を欠損させたマウスのシナプス結合を解析することにより明らかになりました （図2） 。つまりこの酵素は、胎生期の大脳皮質の発生初期にしか働いていないにも関わらず、胎生期の遺伝子発現制御が生後のシナプス結合形成にまで影響を与えているということになります。これは生後の神経ネットワークの形成に、胎生期の遺伝子発現制御が関わることを世界で初めて証明した、驚くべき発見と言えます。

さらに、このDnmt3bは数百種類の遺伝子の発現を制御することが知られていますが、今回の私たちの研究では、Dnmt3bが制御する膨大な量の遺伝子発現の中から、特に姉妹細胞間の双方向性シナプス結合の形成に関わる重要な分子の同定に成功しました。共同研究者である八木教授らの研究グループが発見したクラスター型プロトカドヘリン は58種類の分子からなり、私たちの体をつくる分子の中でもっとも種類が多い細胞接着分子です。個々の神経細胞において、この58種類の中から選ばれた約15種類が発現しており、その15種類の選択にDnmt3bが関わることも八木教授らの研究グループにより明らかにされています。この組み合わせは個々の神経細胞で異なることから、組み合わせのパターンによって神経細胞に個性を持たせていると考えられています。しかし、その多様な発現パターンがどのような働きをしているかについては、これまでほとんど明らかにされていませんでした。

今回私たちは、このクラスター型プロトカドヘリンを欠損させた姉妹細胞間のシナプス結合を解析することで、クラスター型プロトカドヘリンこそが姉妹細胞間に形成される双方向性シナプス結合の発達に必要な分子であることを明らかにしました。この発見は、姉妹神経細胞がお互いを認識する上で、クラスター型プロトカドヘリンが関与していることを世界で初めて証明したものです。

本研究で対象としたDnmt3bの遺伝子異常は、常染色体劣性遺伝病であるICF症候群 の原因と考えられています。今回クラスター型プロトカドヘリンの遺伝子異常が生後のシナプス結合を障害する要因の一つと証明されたことにより、ICF症候群などさまざまな遺伝子異常を伴う疾患のメカニズムの解明と、治療法の開発に貢献できる可能性が示唆されます。

1. 大脳皮質の発生期に同じ神経幹細胞から生まれた姉妹神経細胞は、生後にお互いが選択的にシナプス結合を形成し合うことがわかりました。

2. 胎生期の遺伝子発現制御を手がかりにして、将来的にシナプス結合が形成されることがわかりました。

3. 生後の大脳皮質において姉妹神経細胞がお互いを認識する分子機構に細胞接着因子であるクラスター型プロトカドヘリンが関与することがわかりました。

脳の正常な発達には、あらかじめ遺伝的プログラムにより形成されたシナプス結合が、環境に適応できるように経験に伴い再調整されることが重要です。本研究成果は、遺伝子プログラミングにより形成されるシナプス結合の分子機構の一端を明らかにしたことに意義があります。（本研究で特徴づけたシナプス結合を元にして、経験や学習による神経結合の再調整が行われると予想されます。）また、本研究で対象とした分子に異常があると発達障害の原因になることが報告されているので、本成果がその病態メカニズムの理解、治療法の開発に役立つ可能性が期待されます。

論文タイトル：Establishment of high reciprocal connectivity between clonal cortical neurons is regulated by the Dnmt3b DNA methyltransferase and clustered protocadherins
著者：Etsuko Tarusawa, Makoto Sanbo, Atsushi Okayama, Toshio Miyashita, Takashi Kitsukawa, Teruyoshi Hirayama, Takahiro Hirabayashi, Sonoko Hasegawa, Ryosuke Kaneko, Shunsuke Toyoda, Toshihiro Kobayashi, Megumi Kato-Itoh, Hiromitsu Nakauchi, Masumi Hirabayashi, Takeshi Yagi, and Yumiko Yoshimura
BMC Biology 2016年12月2日オンライン版掲載

図1　蛍光タンパクでラベルされた同じ幹細胞から生まれた神経細胞群と実験方法

図2　今回の発見内容の模式図